胶体金(colloidal gold),又称金溶胶(gold solution),是指分散相粒子直径在l—150nm之间的金溶胶,属于多相不均匀体系,颜色呈桔红色到紫红色。胶体金可以作为标记物用于免疫组织化学,近10多年来胶体金标记已经发展为一项重要的免疫标记技术。胶体金免疫分析在药物检测、生物医学等许多领域的研究已经得到发展,并越来越受到相关研究领域的重视。
胶体金的应用:
1、胶体金在电镜水平的应用。胶体金应用电镜水平的研究最早,发展最快,应用最广泛。其最大优点是可以通过应用不同大小的颗粒或结合酶标进行双重或多重标记。直径为3~15nm 胶体金均可用作电镜水平的标记物。3~15nm的胶体金多用于单一抗原颗粒的检测,而直径15nm多用于检测量较多的感染细胞。
2、胶体金在光镜水平的应用。胶体金同样可用做光镜水平的标记物,取代传统的荧光素、酶等。各种细胞涂片、切片均可应用。主要用于:①用单克窿抗体或抗血清检测细胞悬液或培养的单层细胞的膜表面抗原。②检测培养的单层细胞胞内抗原,③组织中或亚薄切片中抗原的检测。 胶体金用于光镜水平的研究,可以弥补其它标记物不可避免的本底过高和内部酶活性干扰等缺点。
3、胶体金在流式细胞仪中的应用。应用荧光素标记的抗体,通过流式细胞仪计数分析细胞表面抗原,是免疫学研究中的重要技术之一。但由于不同荧光素的光谱相互重叠,区分不同的标记困难,因此必须寻找一种非荧光素标记物,用于流式细胞计数。这样可以同时进行几种标记。该标记物必须能够改变散射角,胶体金可以明显地改变红激光散射角,因而可以作为流式细胞仪的标记物之一。
4、凝集试验:单分散的免疫金溶胶呈清澈透明的溶液,其颜色随溶胶颗粒大小而变化,当与相应抗原或抗体发生专一性反应后出现凝聚,溶胶颗粒极度增大,光散射随之发生变化,颗粒也会沉降,溶液的颜色变淡甚至变成无色,这一原理可定性或定量地应用于免疫反应。
5、免疫印迹技术(immunoblotting):免疫印迹是一种较新的免疫化学技术。用聚丙烯酰胺凝胶电泳将蛋白质分离,得到的区带转移至硝酸纤维素膜,然后用酶免疫法(或免疫荧光、RIA)进行定量。免疫胶体金也可用于该法的定量。转移后的硝酸纤维素膜与某特异性的抗体保温后,再与经葡萄球菌A蛋白致敏的胶体金温育,彻底洗去多余的胶体金,根据膜上胶体金颗粒颜色深浅可测知样品中的特异性抗原。
6、胶体金在肉眼水平的应用。胶体金取代传统三大标记物,用于肉眼水平的免疫检测中。除了胶体金本身具有的特点外,还有以下优点:①试剂和样本用量极小,样本量可低至1~2ul;②不需γ-计数器、荧光显微镜、酶标检测仪等贵重仪器,更适于现场应用; ③没有诸如放射性同位素、邻苯二胺等有害物质参与;④实验结果可以长期保存;⑤时间大大缩短,提高了检测速度。金标过程中,无共价键形成,是一定离子浓度下的物理吸附。因此几乎所有的大分子物质都可被金标记,标记后大分子物质活性不发生改变。实验结果表明,胶体金的敏感性可达到 ELISA的水平。而结合银染色时,检测的敏感性更大大提高。
深芬仪器CSY-JA胶体金快速测定仪应用胶体金免疫层析技术的原理,通过反射光谱法测试CT线强弱程度可检测PCT、HIV、CRP、NT-proBNP、MYO、CPV、CDV、FPV等免疫层析胶体金法诊断卡条或乳胶条,干式分析法卡条或乳胶条等模块制成的兽药残留、瘦肉精、抗生素残留、动物疫病、农药残留、临床疫病、水质安全、转基因等有毒有害物质残留项目。
胶体金快速测定仪检测项目:
1、兽药残留类:克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺、呋喃唑酮、呋喃妥因、呋喃西林、呋喃它酮、孔雀石绿、氯霉素、酰胺类、四环素、喹诺酮、磺胺、黄曲霉毒素B1、呕吐毒素、三聚氰胺、重金属铅、重金属镉、重金属铜、内酰胺类、喹乙醇、红霉素、西地那非、他达拉非、布洛芬、安乃近、西布曲明、糖皮质激素、咖啡因、五氯酚钠、头孢氨苄、甲硝唑、庆大霉素、青霉素、链霉素、甲氧卞胺嘧啶、替米考星、甲砜霉素、赛跟定、己烯雌酚、阿苯达唑、氟苯尼考、地塞米松、甲基睾酮、睾酮、卡那霉素、新霉素、林可霉素、氯丙嗪、氢化可的松、阿维菌素、氧氟沙星、肉类掺假(掺鸡肉)、妥布霉素、阿奇霉素、泰乐菌素、安普霉素、头孢噻呋、克拉霉素、类固醇激素、痢菌净、组胺、双氯芬酸钠、对乙酰氨基酚、吲哚美辛、阿莫西林、替米考新、金刚烷胺等兽药残留及抗生素残留;
2、农药残留类:菊酯类、百菌清、百草枯、乙草胺、毒死蜱、多菌灵、杀菌剂、甲拌磷、甲草胺、咪鲜胺、无根水、6苄氨基嘌呤、阿维菌素、吡虫啉、啶虫脒、多效唑、甲基对硫磷、甲萘威、克百威、腐霉利、甲霜灵、三唑酮、三唑磷、氯虫苯甲酰胺、灭蝇胺、噻虫嗪、噻虫啉、噻虫胺、哒螨灵、水胺硫磷、联苯菊酯、烯酰吗啉、吡唑醚菌酯、4-氯苯氧乙酸钠、波尔多液、唑虫酰胺、氟节胺、甲基异柳磷、氟虫氰、嘧霉胺、霜霉威、赤霉素、氟节胺、腈菌唑、戊唑醇等农药残留;
3、水产安全类:呋喃唑酮、呋喃妥因、呋喃西林、呋喃它酮、孔雀石绿、氯霉素、五氯酚钠、磺胺、喹诺酮、头孢氨苄、酰胺类、四环素、甲硝唑、庆大霉素、链霉素、甲氧卞胺嘧啶、喹乙醇、红霉素、替米考星、甲砜霉素、赛跟定、己烯雌酚、阿苯达唑、氟苯尼考、地塞米松、甲基睾酮、睾酮、卡那霉素、新霉素、林可霉素、氯丙嗪、氢化可的松、阿维菌素、氧氟沙星、肉类掺假(掺鸡肉)、妥布霉素、阿奇霉素、泰乐菌素、安普霉素、头孢噻呋、克拉霉素、类固醇激素、重金属铜、重金属铅、重金属镉、痢菌净、组胺、双氯芬酸钠、对乙酰氨基酚、吲哚美辛、阿莫西林、替米考新、金刚烷胺等兽药残留及抗生素残留;
4、瘦肉精:克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺、苯乙醇胺A等激素残留类;
5、蜂蜜安全类:氯霉素、喹诺酮、磺胺、青霉素、四环素、甲硝唑蜂蜜、呋喃唑酮蜂蜜、呋喃它酮、呋喃妥因、呋喃西林等兽药残留及抗生素残留;
6、禽蛋类:喹诺酮、磺胺、青霉素、林可霉素、庆大霉素、四环素、氟苯尼考、卡那霉素、金刚烷胺、氯霉素、泰乐菌素、阿莫西林、替米考新、氟虫氰、氯羟吡啶、安普霉素、痢菌净、红霉素等兽药残留及抗生素残留;
7、色素类:赤藓红、碱性橙、柠檬黄、日落黄、苏丹红、罗丹明B、硫酸铜、酸性橙等
8、奶类:内酰胺类、四环素、多菌灵、氯霉素、金霉素、土霉素、黄曲霉毒素M1、喹诺酮、磺胺、庆大霉素、卡那霉素、羊奶掺假、林可霉素、三聚氰胺、新霉素、大观霉素、替米考星、红霉素、链霉素、内酰胺酶、头孢氨苄、泰乐菌素、地塞米松、苯甲酸、甲硝唑、头孢噻呋、阿维菌素、骆驼奶掺假、乳品掺奶精、羊奶蛋白、、吡虫啉、啶虫脒、布病、重金属铅等兽药残留及抗生素残留;
9、饲料安全类:磺胺、喹诺酮、内酰胺类、林可霉素、庆大霉素、四环素、氟苯尼考、卡那霉素、金刚烷胺、氯霉素、三聚氰胺、黄曲霉毒素B1、呕吐毒素、玉米赤霉烯酮、喹乙醇、T2毒素、伏马毒素、阿苯达唑、地克珠利、尼卡巴嗪、赭曲霉毒素A、氯羟吡啶等兽药残留及抗生素残留;
10、转基因类:转基因CP4、转基因BT、转基因BAR等转基因;
11、动物疾病类:牛羊结核、布病、猫瘟、犬细小等动物疾病;